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核酸杂交是指用一种标记的核酸探针与印迹膜上的核酸进行杂交，由此检测印迹膜上是否存在与探针同源的核酸分子。当探针是Oligo分子时，需要使用专门的核酸杂交液，本制品就是为此开发的Oligo探针专用杂交。

• 即开即用，使用方便。
  
• 既可以用于DNA Oligo探针杂交，也可以用于RNA Oligo探针杂交。
  
• 本制品足够5平方厘米印迹膜的10次核酸杂交。
  
• 本制品只可用于科研。

1. Oligo探针的最佳杂交温度一般比Tm低5℃。计算Tm的公式是Tm=GC数量×4℃+AT数量×2℃。但由于Oligo较短，更容易受各种因素影响（如错配率、修饰碱基比例等），所以最佳温度可能还需要适度摸索和优化。Oligo探针可以在室温洗膜。

2. 将转膜所得的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中，使其充分湿润。
   
3. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中（塑料袋最好预先封口，再剪掉一角，留一个小口），按每平方厘米印迹膜加0.2mL本制品的比例沿小口加入本制品，然后用塑料封口机将口封牢。
   
4. 将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中，保温1～2小时，延长到12～16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中，使本制品与印迹膜充分接触。

5. 将Oligo探针加入到完成了预杂交的杂交袋中（先用剪刀剪一小口，加入Oligo探针后用热封机封口）。Oligo探针的加入量视探针标记效率而定，一般要求终浓度不能低于1～2ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因，Oligo探针的加入量应加大，而对于检测克隆的基因片段，则Oligo探针的量可减少。如果是放射性Oligo探针，应将此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
   
6. 在选定的杂交温度下继续保温，时间一般为6～12小时。

7. 杂交完毕，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含Oligo探针的杂交液。此含Oligo探针的杂交液可以多次使用。
   
8. 剪开杂交袋，用镊子取出印迹膜，浸没于大量的2×SSC（含0.5% SDS）溶液中，室温下振荡漂洗15分钟。洗膜时一定不要使印迹膜干燥。
   
9. 重复上步操作一次。
   
10. 将印迹膜转移至0.1×SSC（含0.1% SDS）溶液中，在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
    
11. 重复上步操作一次。
    
12. 将印迹膜转移到滤纸上，吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。